Jeu, uniquement multi-joueurs en ligne (sur Internet ou en LAN), se déroule dans un contexte très classique : dans un futur plutôt lointain. Deux équipes de joueurs très différentes s'opposent : les Humains contre les Aliens en combinant les genres du jeu de stratégie en temps réel et du jeu de tir subjectif. Chaque camp (humains ou aliens) a ses forces et ses faiblesses.
La particularité de Tremulous est la construction de structures spécifiques destructibles : défenses, points de déploiement, armureries, ... L'équipe qui parvient à détruire tous les points de déploiement et tous les membres de l'équipe adverse remporte la victoire.